INN/ET23/7:2024 ISO/TS 21569-7:2022

Alcance

Este documento especifica un procedimiento para la detección de una secuencia de ADN del marco abierto de lectura cinco (ORF V) del virus del mosaico de la coliflor (CaMV) y un procedimiento para la detección de la secuencia de ADN del gen de la nopalina sintasa (nos) de plásmidos inductores de tumores (Ti) de Rhizobium radiobacter fitopatógeno (anteriormente denominado Agrobacterium tumefaciens). Los procedimientos se pueden utilizar en el contexto del cribado de cultivos/plantas genéticamente modificadas y sus productos derivados para aclarar aún más un resultado positivo de PCR para un promotor o terminador específico de CaMV (P-35S, T-35S), o ambos, y el gen nos (P-nos, T-nos), respectivamente.Los métodos especificados en este documento detectarán e identificarán el ADN natural de CaMV o Rhizobium radiobacter (plásmido Ti), o ambos, si están presentes en la muestra en ausencia de un evento de planta genéticamente modificada que contenga las secuencias objetivo especificadas.Ambos métodos se basan en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real y son aplicables para el análisis de ADN extraído de alimentos y otros productos como piensos y semillas/granos. La aplicación de los métodos requiere la extracción de una cantidad adecuada de ADN amplificable de la matriz pertinente.Con el material de calibración apropiado, el número de copias del CaMV ORF V o nos, o ambos, se puede estimar y comparar, respectivamente, con el número de copias estimado para las secuencias promotoras (P-35S, P-nos) o terminadoras (T-35S, T-nos), o ambas. De este modo, es posible llegar a conclusiones sobre la presencia de un organismo genéticamente modificado (OGM) desconocido, así mismo sobre cualquier ADN de CaMV o ADN de plásmido de Rhizobium radiobacter Ti detectado, o ambos, en una muestra de ensayo.